Kamiya  KT-642說(shuō)明書(shū)

世界*實(shí)驗(yàn)材料供應(yīng)商 KAMIYA正式授權(quán)上海起發(fā)為其中國(guó)代理， KAMIYA在一直是行業(yè)的*,一直為廣大科研客戶(hù)提供zui為的產(chǎn)品和服務(wù),上海起發(fā)一直秉承為中國(guó)科研客戶(hù)帶來(lái)的產(chǎn)品，的服務(wù)，簽約KAMIYA就是為了給廣大科研客戶(hù)帶來(lái)更加完善的產(chǎn)品和服務(wù),您的滿意將是我們zui大的收獲

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Kamiya Biomedical Company是一家1983年3月成立的美國(guó)生命科學(xué)技術(shù)公司，總部位于美國(guó)加利福尼亞州。本公司致力于為生命科學(xué)研究和醫(yī)藥機(jī)構(gòu)提供高質(zhì)量的具有創(chuàng)新性的基礎(chǔ)研究和診斷試劑。

公司的zui早的生命科學(xué)研究產(chǎn)品是用于信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究用蛋白酶抑制劑星形孢菌素和K252a。1990年，KAMIYA*家在美國(guó)推出凋亡研究的重要抗體anti-Fas單克隆抗體。1997年推出了一個(gè)完整的臨床診斷和研究用免疫檢測(cè)產(chǎn)品線，生產(chǎn)基于免疫投射比濁法的脂質(zhì)測(cè)定、凝血、炎癥、糖尿病、營(yíng)養(yǎng)評(píng)估及血脂蛋白測(cè)定試劑及試劑盒。公司研發(fā)的K-ASSAY試劑無(wú)需攪拌、溶解和稀釋樣本等繁雜程序。

如今，KAMIYA供應(yīng)的生命科學(xué)系列產(chǎn)品包括世界上zui大的ELISA試劑盒產(chǎn)品線，上萬(wàn)種人類(lèi)的生物標(biāo)志物分析的產(chǎn)品、酶抑制劑、單抗、多抗。產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于細(xì)胞凋亡、多抗藥性、氧化/ DNA損壞和修復(fù)、骨生物學(xué)、癌癥、心臟健康、炎癥、壓力與應(yīng)激、肥胖和糖尿病等研究領(lǐng)域。

zui近，KAMIYA又推出了創(chuàng)新性的基于K-ASSAY化學(xué)檢測(cè)試劑的胰島素、D-二聚體(D-Dimer)，F(xiàn)actor XIII，纖維蛋白原降解產(chǎn)物(Plasma FDP)，血清/尿液FPD及FDP-E(纖維蛋白原降解產(chǎn)物E片段)和總IgE等因子的檢測(cè)試劑。

KAMIYA現(xiàn)在擁有zui全的血清蛋白免疫檢測(cè)試劑產(chǎn)品線，為醫(yī)院、醫(yī)療中心、臨床實(shí)驗(yàn)室、臨床參考實(shí)驗(yàn)室、研究所等眾多機(jī)構(gòu)提供專(zhuān)業(yè)的臨床診斷和科研試劑產(chǎn)品。

貨號(hào)：KT-642

品名：Monkey Cardiac Troponin-I, High Sensitive ELISA（高敏肌鈣蛋白I ELISA試劑盒，猴子）

產(chǎn)品介紹

肌鈣蛋白是橫紋肌收縮調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物。它由三個(gè)亞單位組成：肌鈣蛋白I、T和C。I存在三種異構(gòu)體；一在快肌骨骼肌，一個(gè)在慢肌骨骼肌，另一個(gè)在心肌。肌肉損傷或缺血后，肌鈣蛋白被釋放到血液中，肌鈣蛋白的含量水平與組織損傷密切相關(guān)。心肌肌鈣蛋白I（cTnI）序列與骨骼肌亞型明顯不同，從而促進(jìn)了cTnI特異性抗cTnI抗體的生成和免疫特異性的發(fā)展。由于cTnI在心臟中的特異性表達(dá)，它提供了一種特異的心臟損傷生物標(biāo)記物。

工作原理

高敏猴肌鈣蛋白I ELISA試劑盒使用兩親和純化抗體，一種兔抗cTnI多克隆抗體用于將固相載體固定在微孔板上，另一種山羊抗cTnI肽特異性多克隆抗體與辣根過(guò)氧化物酶（HRP）結(jié)合，用于檢測(cè)。樣品（血清或血漿）和校準(zhǔn)（200µL）被移進(jìn)微孔板震蕩孵化2h后，添加100ul稀釋劑和100ulHRP共軛抗cTnI抗體到微孔板上，然后平板搖床孵化1h。在這個(gè)步驟中，cTnI被夾在固相和HRP結(jié)合的抗體之間。然后洗滌微孔板去除未結(jié)合的辣根過(guò)氧化物酶共軛抗體。添加HRP底物TMB 100µL，孵育20分鐘，結(jié)果出現(xiàn)藍(lán)色。加入100ul 1N HCl使發(fā)色終止，改變顏色為黃色，在450 nm處測(cè)量吸光度值。cTnI濃度與450 nm處吸光度值成正比，可由校準(zhǔn)曲線得出。

校準(zhǔn)品的制備

為制備至少兩條校準(zhǔn)曲線提供了足夠的試劑。

1. 試劑盒組成平衡至室溫后使用。

2. 加200 ul去離子水或蒸餾水使用儲(chǔ)存的凍干血清cTnI復(fù)原。輕輕攪拌超過(guò)5min。

3. 添加7支聚丙烯管標(biāo)簽分別為2.5，1.25，0.625，0.312，0.156，0.078和0.039 ng/ml。

4. 在標(biāo)記為2.5ng/ml的管中，移入983.06µL cTnI稀釋劑，16.94µL cTnI庫(kù)存產(chǎn)品輕    輕混合。即為2.5ng/ml的校準(zhǔn)液。

5. 吸取0.50ml的cTnI稀釋到標(biāo)記1.25，0.625，0.312，0.156，0.078和0.039ng/ml    的管中。

6. 通過(guò)稀釋和混合0.50ml 2.5ng/ml的校準(zhǔn)液和0.50ml的稀釋劑，即可配制得到        1.25ng/ml的校準(zhǔn)液。同樣通過(guò)連續(xù)稀釋制備0.625，0.312，0.156，0.078，和      0.039ng/ml的校準(zhǔn)液。

備注：復(fù)原后的cTnI庫(kù)存產(chǎn)品應(yīng)在使用后立即凍結(jié)。它在冷凍狀態(tài)下保持穩(wěn)定。-20°至    少1個(gè)月，-70°保存6個(gè)月。使用后的校準(zhǔn)液丟棄。

檢測(cè)操作過(guò)程

1. 將所需用的微孔板固定到支架是；

2. 取200ul 校準(zhǔn)液和樣品到合適的微孔板上；

3. 150 rpm搖床25°C孵化2h；

4. 使用洗板洗滌微孔板5次，每孔400ul洗滌液，整個(gè)過(guò)程應(yīng)快速進(jìn)行；

5. 用吸附紙或紙巾吸附微孔板，以除去所有殘留的液體；

6. 每孔添加100ul cTnI稀釋劑；

7. 添加100ul HRP共軛復(fù)合物到每個(gè)微孔中；

8. 150 rpm搖床25°C孵化1h；

9. 按步驟4和5清洗微孔板；

10. 吸取100ul TBM試劑到每個(gè)微孔中；

11. 150 rpm搖床25°C孵化20min；

12. 每個(gè)微孔中添加100ul 終止液終止反應(yīng)；

13. 輕輕混合直到所有的藍(lán)色變成黃色；

14. 在5min內(nèi)讀取溶液450nm處的吸光度值；

15. 如果吸光度值超過(guò)了校準(zhǔn)品的zui高值，樣品就適當(dāng)稀釋并重新測(cè)定。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

產(chǎn)品鏈接：http://www.k-assay。。ｃｏｍ/cgi-bin/search.cgi?search=KT-642&table=&species=&int=&app=&language=english

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