BioAssay Systems 開發(fā)和銷售創(chuàng)新的高通量分析解決方案，以滿足生命科學(xué)行業(yè)不斷增長的需求。BioAssay Systems 的創(chuàng)始人在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)方面擁有超過 50 年的豐富經(jīng)驗。在過去的 18 年中，我們?yōu)樗幬锇l(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究開發(fā)了 200 多種檢測試劑盒。

上海起發(fā)bioassaysys SLLU-200說明書

SuperLight™ Luciferase Reporter Gene Assay Kit

SuperLight™ 螢光素酶報告基因檢測試劑盒

貨號： SLLU-200

應(yīng)用

• 用于快速定量轉(zhuǎn)染細(xì)胞中熒光素酶報告基因表達(dá)和高通量藥物篩選的明亮生物發(fā)光試劑系統(tǒng)。

主要特點(diǎn)

• 高靈敏度和寬檢測范圍：檢測低至 2 fg 熒光素酶和低至 4 個細(xì)胞。此外，發(fā)射的光在七個數(shù)量級上呈線性。

• 與常規(guī)實驗室和 HTS 格式兼容：可以在 LJL Analyst、Berthold Luminometer、Top-Count、MicroBeta 計數(shù)器、化學(xué)發(fā)光圖像讀板器 (CLIPR/LeadSeeker) 上在試管或微孔板中進(jìn)行分析。與所有液體處理系統(tǒng)兼容的檢測試劑。

• 快速方便：均質(zhì)“混合和測量"測定法可在 10 分鐘內(nèi)檢測熒光素酶水平。最佳組合的試劑系統(tǒng)允許一個單一的添加步驟，以及同時的細(xì)胞裂解和檢測。

• 堅固且適用于 HTS：在 96 孔和 384 孔板中觀察到 Z 因子為 0.6 至 0.8。可以在 HTS 液體處理系統(tǒng)上輕松實現(xiàn)自動化。

方法

• 發(fā)光

樣品

• 細(xì)胞等

物種

• 全部

尺寸

• 200 次測試

檢測限

• 2 fg 螢光素酶

保質(zhì)期

• 12個月

更多細(xì)節(jié)

• SuperLight™ 螢光素酶報告基因檢測基于對哺乳動物、酵母或大腸桿菌細(xì)胞中螢光素酶表達(dá)的定量，使用螢光素和 ATP 作為底物。該反應(yīng)產(chǎn)生光，可以方便地在光度計上測量。這種生物發(fā)光報告基因檢測非常靈敏，特別適用于量化重組細(xì)胞中的熒光素酶表達(dá)。這種超靈敏、均質(zhì)的基于細(xì)胞的測定只需向細(xì)胞中添加一種試劑，并在短暫的孵育步驟（2 分鐘）后測量光強(qiáng)度。測定可以在試管、比色皿或多孔板中進(jìn)行。所有試劑盒組件都與培養(yǎng)基和所有液體處理系統(tǒng)兼容。具有延長的發(fā)光發(fā)射動力學(xué)（半衰期 40 分鐘），SuperLight™ 螢光素酶檢測特別適用于 96 孔、384 孔和 1536 孔板中的高通量篩選。此外，試劑盒中提供的試劑經(jīng)過精心配制，具有最高的靈敏度、重現(xiàn)性和長保質(zhì)期。該試劑盒的應(yīng)用包括基因調(diào)控研究和基因調(diào)節(jié)劑的高通量篩選。

我們可以確定大腸桿菌細(xì)胞中的 ATP 濃度嗎？

是的。Ishida A (2002, Anal. Biochem 305, 236-241) 描述了使用等體積的 10% TCA 和大腸桿菌細(xì)胞培養(yǎng)物。在室溫下靜置 3 分鐘。將 1 vol 的細(xì)胞提取物與 19 vol 的 25 mM Hepes、17 mM NaOH 混合，并在測定前將 pH 調(diào)節(jié)至 7.8。

在 24 孔格式下工作時，如何調(diào)整您的方案以適應(yīng)貼壁細(xì)胞？

裂解 24 孔板中的細(xì)胞，然后將 50 µL 細(xì)胞裂解液加入 50 µL SuperLight 試劑（10 µL + 10 µL 也可以）?；蛘撸梢杂靡鹊鞍子厦?EDTA 收集細(xì)胞，將細(xì)胞重新懸浮在相同體積（200-500 μL 培養(yǎng)基）中。進(jìn)行 50 μL + 50 μL 測定。