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Abraxis544100使用方法

更新時(shí)間:2018-12-04      點(diǎn)擊次數(shù):2970

 

 

Abraxis544100使用方法

 

 

  • 通用描述AbraMag DNA大小選擇磁珠設(shè)計(jì)用于從剪切的DNA或類似樣本中純化出所需大小的DNA片段,用于下游應(yīng)用,如 作為排序。碎片被可逆地結(jié)合在順磁性粒子上,而剩余的引物、鹽、酶和在反應(yīng)中留下的游離核苷酸被沖走。這些珠子是為使用而設(shè)計(jì)的。 有磁選機(jī)架。
  • 當(dāng)使用核酸時(shí),安全指南總是使用適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)設(shè)備(包括但不限于手套、實(shí)驗(yàn)室外套和安全玻璃)。 。有關(guān)進(jìn)一步信息,請(qǐng)參閱安全數(shù)據(jù)表。
  • 儲(chǔ)存和穩(wěn)定在交貨時(shí),存放在4°C,不要凍結(jié)磁珠溶液。不要在打印的過(guò)期日期后使用。
  • Abramag DNA大小選擇磁珠法使用一種簡(jiǎn)單、、基于磁性珠的方法從混合反應(yīng)中純化DNA片段,如下所示 gure

 

 

 

Figure 1. Schematic of the AbraMag® DNA Size Selection Magnetic Beads process.

 

  • a.混合:將混合樣品添加到已清洗的AbraMag磁珠中。

b.結(jié)合:在經(jīng)過(guò)優(yōu)化的緩沖器存在的情況下,具有理想大小的DNA片段與珠子結(jié)合。磁鐵是用來(lái) 守住珠子。

.c.洗滌:底漆和/或其他不想要的試劑分兩步洗掉

  • 洗脫:然后將碎片洗脫并轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的管中。

.E.Downstr EAM應(yīng)用:純的,高質(zhì)量的分離DNA片段可用于下游程序,如克隆和測(cè)序。

 

 

 

限制和預(yù)防措施樣品表現(xiàn)的時(shí)候,在分子生物學(xué)級(jí)水或Tris/TE溶液之前,尺寸選擇。如果需要一個(gè)簡(jiǎn)單的pcr清理(>100 bp),而不是大小se(>100 bp)。 使用Abramag聚合酶鏈反應(yīng)清潔磁珠(PN 555030(5 ML),555035(60 ML),555040(450 ML)。

 

工作指令

 

A.提供的材料AbraMag DNA大小選擇磁珠溶液

 

B.所需的額外材料和設(shè)備(不包括在產(chǎn)品中)

 

1.剪切DNA或其他樣本

 

2.實(shí)驗(yàn)室級(jí)水

 

3.新制備的70%乙醇

 

4.分子級(jí)TE緩沖液pH 8.0(10 mm Tris,1mm EDTA pH 8.0)

 

5.一次性手套和其他防護(hù)設(shè)備

 

6.帶一次性塑料過(guò)濾屏障的微型吸管

 

7.1.5mL無(wú)菌無(wú)核酸微離心管

 

8.4°C制冷機(jī)

 

9.磁性微離心管分離器,Solo(PN 472270),Multi-6(Pn 472260),微滴板側(cè)拉(Pn 472235)或底拉(Pn 472236)或類似設(shè)備

 

10. Vortexer

 

C.為所需尺寸選擇珠比

 

通過(guò)改變Abramag DNA大小選擇磁珠與起始樣品體積的比值,可以控制有利于50~400 bp的DNA片段的截留。圖2 下面是凝膠電泳分析的大小選擇根據(jù)增加的比率。例如,檢查表1的比率。

 

 

 

圖2.DNA梯狀電泳的2%瓊脂糖凝膠電泳顯示珠液與樣品比對(duì)片段大小排除的影響。100伏25分鐘。

 

 

表1.示例珠比和由此產(chǎn)生的大小選擇使用50公分的起始樣本。

 

D.程序

 

將樣品轉(zhuǎn)移到1.5mL微離心管中進(jìn)行純化。用實(shí)驗(yàn)室級(jí)水將樣品稀釋至少50升.注意:要使用更大容量的開始樣本,只需乘以 按預(yù)期比率計(jì)算(第6.C節(jié))。例:100升樣品x1.5=使用第6.D.2節(jié)中150升的珠子溶液。注:可以節(jié)省少量的起始產(chǎn)品用于凝膠分析。見(jiàn)第7.B節(jié)。

 

用~1秒脈沖旋轉(zhuǎn)AbraMag DNA大小選擇磁珠。確保解決方案*重新暫停。檢查第6.C節(jié)以確定使用煙草的珠子溶液的數(shù)量 將珠子添加到所需的比例并添加到樣品中。吸管上下混合。建議嘗試與所需大小選擇接近的比率范圍,以便選擇 模仿片段大小選擇。

 

將樣品/珠子混合物在室溫下孵育5分鐘。

 

將樣品放在磁選機(jī)上,直到溶液清澈(~1分鐘)。將管子留在分離器上,吸走并丟棄上清液,而不干擾有蓋特的珠子。 對(duì)著磁鐵。5.將管子放在分離器上,輕輕地加入200升新鮮配制的70%乙醇,而不將珠子從管子的側(cè)面移開。坐30秒。吸出 把上清液扔掉。

 

6.重復(fù)步驟5進(jìn)行第二次清洗。小心去除所有可吸入乙醇。

 

7.將管子從磁選機(jī)上取出,在室溫下離開約3分鐘,打開蓋子,*蒸發(fā)任何殘留的乙醇。

 

8.在樣品中加入40升TE緩沖液、pH8.0或?qū)嶒?yàn)室級(jí)水。吸管上下混合。室溫下孵育2-3分鐘。將管子送回磁選機(jī)1米 降落傘。將試管留在分離器上,用吸管將洗脫液轉(zhuǎn)移到新的微離心管中。洗脫液中含有大小選定的DNA片段。

 

7分析結(jié)果

 

A.產(chǎn)品回收可以使用帶插層染料的熒光計(jì)、凝膠電泳分析和/或分光度計(jì)來(lái)確定。

 

確定凝膠電泳法可用于評(píng)價(jià)大小選擇的效果,并可用于檢查比例的優(yōu)化。使用瓊脂糖或凝膠,運(yùn)行洗脫樣本。 在科收回

 

D.8與分子量階梯相比較,確保選擇了所需的片段大小。

AbraMag ®磁珠超順磁性,非聚集的鐵氧化物顆粒(或“微球”),用于樣品制備,或用于捕獲/純化(SPRI ™:固相可逆固定)靶例如蛋白質(zhì),抗體, DNA / RNA(直接,或通過(guò)ChIP,RIP或CLIP),外泌體和大腸桿菌。AbraMag的設(shè)計(jì)可在手動(dòng)和自動(dòng)生物醫(yī)學(xué)和研究應(yīng)用中實(shí)現(xiàn)更快的結(jié)合動(dòng)力學(xué),高靈敏度和選擇性。

 

比主要競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手更高的產(chǎn)量,純度,質(zhì)量和價(jià)值。

 

● 多重優(yōu)勢(shì) - 超過(guò)傳統(tǒng)方法(色譜柱,離心)。

● 的性能 - 我們?cè)O(shè)計(jì)它們以匹配或超越競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手。

● 的容量和產(chǎn)量 - 高結(jié)合能力,可快速有效地進(jìn)行目標(biāo)純化。

● 的純度 - 穩(wěn)定的預(yù)先封閉的顆粒即使是復(fù)雜的樣品也能提供清潔的凈化。

● 可定制 - 提供定制珠子和連接服務(wù)。

 

磁選機(jī)

反-E。大腸桿菌磁珠(IMS)

即用型磁珠,25 mg / ml(2.5%)

具有游離胺或羧基的磁性顆粒,可使用簡(jiǎn)單的步驟(提供)與您的抗體或其他配體偶聯(lián)。

胺 - PN 544080(2 ml),PN 544081(5 ml)

羧基 - PN 544085(2 ml),PN 544086(5 ml)。

Protein A / Protein G Magnetic Beads,5 mg / ml

Protein A Magnetic Beads - PN 544030(2 ml),PN 544031(5 ml)

蛋白A磁珠純化試劑盒 - PN 555000(20個(gè)樣品)

蛋白G磁珠 - PN 544040(2 ml),PN 544041(5 ml)

蛋白G磁珠純化試劑盒 - PN 555010(20個(gè)樣品)

抗IgG磁珠,5 mg / ml

抗小鼠IgG磁珠 - PN 544020(4 ml),PN 544021(20 ml)

抗兔IgG磁珠 - PN 544010(4 ml), PN 544011(20 ml)

抗人IgG磁珠 - PN 544060(4 ml),PN 544061(20 ml)

Streptavidin / Biotin Magnetic Beads,5 mg / ml

Streptavidin Magnetic Beads - PN 544050(2 ml),PN 544051(5 ml)

生物素磁珠 - PN 544000(2 ml),PN 544001(5 ml)

 

DNA / RNA純化磁珠

新 DNA尺寸選擇/ PCR純化磁珠

AbraMag ® DNA尺寸選擇和PCR純化磁珠被設(shè)計(jì)成凈化所需大小的DNA片段。

●為了替代AMPure ® XP / SPRIselect ®和血清彈匣 ™ Speedbeads ™的性能相當(dāng),但更好的價(jià)值(參見(jiàn)比較數(shù)據(jù))。

●去除污染物:引物,引物二聚體,dNTP,鹽等。

●尺寸截止范圍> 50至> 800 bp(尺寸選擇)或> 100bp(PCR純化)

●處理時(shí)間短:無(wú)離心或過(guò)濾

●管或微孔板格式

●適合手動(dòng)或自動(dòng)過(guò)程

DNA大小選擇Magnetic Beads PN 544100(5 ml),544103(60 ml),544106(450 ml)

PCR Clean-Up Magnetic Beads PN 555030(5 ml),555035( 60 ml),555040(450 ml)

DNA純化磁珠,12毫克/毫升

AbraMag ® DNA純化磁珠結(jié)合在高容量DNA(基因組,質(zhì)粒等)。將它們插入您當(dāng)前的磁珠DNA純化方案中,以獲得更高的產(chǎn)量,純度和價(jià)值。珠子的表現(xiàn)始終優(yōu)于競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手的珠子(參見(jiàn)比較數(shù)據(jù))。

PN 544090(1ml)

基因組DNA純化試劑盒,磁珠

的AbraMag ®基因組DNA磁性純化試劑盒被設(shè)計(jì)為從不同的生物樣品純化的基因組DNA,得到DNA的高收率和低RNA,蛋白質(zhì),核酸酶,和其它細(xì)胞污染物。

PN 555020(100個(gè)樣本)

mRNA純化磁珠,為5mg / ml的

AbraMag ® mRNA純化磁珠加上寡(dT)25,在高容量結(jié)合多聚腺苷酸化的mRNA和mRNA的洗脫基本上不含核糖體RNA。將珠子插入您當(dāng)前的磁珠mRNA純化方案中,以獲得更高的產(chǎn)量,純度和價(jià)值。

PN 544075(2ml)

mRNA純化試劑盒,磁珠

的AbraMag ® mRNA的磁性純化試劑盒被設(shè)計(jì)為從總RNA純化的mRNA,使多聚腺苷酸化的信使RNA的高產(chǎn)量,同時(shí)留下核糖體RNA(rRNA基因)和其他RNA后面。

PN 555025(10個(gè)樣本)

 

 

 

 

 

 

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