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Enzymatics L6020L 說明書

更新時間:2018-04-11      點(diǎn)擊次數(shù):3217

 

貨號:L6020L

品名:T7 DNA Ligase(T7 DNA連接酶)

產(chǎn)品描述:

T7 DNA連接酶催化雙鏈DNA中5'磷酸和3'羥基末端之間形成磷酸二酯鍵。該酶將加入平端和粘性末端以及修復(fù)雙鏈DNA中的單鏈缺口。

 

規(guī)格:

900,000 U

濃度

3,000,000 U/ml

保存

-25°C至-15°C

純度(SDS-PAGE)

> 99%

活性:

3,000,000 U/mg

SS核酸外切酶

30,000 U <1.0% released

DS核酸外切酶

30,000 U <1.0% released

DS內(nèi)切核酸酶

30,000 U = No conversion

大腸桿菌 DNA污染

30,000 U <10 copies

其他

1.在沒有高濃度擁擠劑(例如20-30%PEG 6-8000)的情況下,T7 DNA連接酶的特異性活性在平末端片段上減少1000倍(1,2)。

2.T7 DNA連接酶不能連接單鏈DNA的片段(1)。

 

蛋白質(zhì)來源

攜帶T7 DNA連接酶基因的重組大腸桿菌菌株。

 

提供

20mM Tris-HCl 
50mM NaCl 
1mM DTT 
0.1mM EDTA 
50%甘油
pH 7.5在25℃

 

隨附:

 

B1010 (2X Rapid Ligation Buffer)

2X Rapid Ligation Buffer (B1010):
132mM Tris-HCI
20 mM MgCl2
2 mM DTT
2 mM ATP
15% PEG 6000
pH 7.6 @ 25°C

 

單位定義 
1單位定義為在23℃30分鐘內(nèi)連接50ng 100ng DNA的片段與粘性末端所需的T7 DNA連接酶的量。

 

質(zhì)量控制分析

 

單位表征測定
單位活性使用2倍系列稀釋法測量。在1X快速連接緩沖液中進(jìn)行酶稀釋,并加入到20μL含有雙鏈DNA的片段和1X快速連接緩沖液的反應(yīng)中。將反應(yīng)在?23℃(室溫)孵育30分鐘,在冰上沉降,并在用溴化乙錠染色的1%瓊脂糖凝膠上分析。

 

蛋白質(zhì)濃度(OD 280)測量使用使用2.0mg / ml BSA樣品(Pierce Cat#23209)標(biāo)準(zhǔn)化的Nanodrop ND-1000分光光度計
在OD 280處分析2.0μL酶樣品并用產(chǎn)品儲存溶液沖切。觀察到的3個重復(fù)樣品的平均測量值使用67,850的消光系數(shù)和41,132道爾頓的分子量轉(zhuǎn)換為mg / mL。

 

SDS-Page(物理純度評估)

將2.0μL濃縮的酶溶液加載到變性的4-20%Tris-甘氨酸SDS-PAGE凝膠上,該凝膠側(cè)翼為寬范圍的MW標(biāo)記和2.0μL的樣品的1:100稀釋物。電泳后,將凝膠染色并比較??樣品以確定物理純度。該測試的驗收標(biāo)準(zhǔn)要求濃縮樣品中污染帶的總量不超過稀釋樣品中目的蛋白質(zhì)條帶的質(zhì)量,確認(rèn)濃縮樣品的純度大于99%。

 

污染測試

單鏈核酸外切酶活性
將含有10,000cpm放射性標(biāo)記的單鏈DNA底物和10μL酶溶液的50μL反應(yīng)物在37℃下溫育4小時,導(dǎo)致TCA可溶性計數(shù)的釋放小于1.0%。

 

雙鏈切核酸酶活性將含有5,000cpm放射性標(biāo)記的雙鏈DNA底物和10μL酶溶液的50μL反應(yīng)物在37℃下溫育4小時,導(dǎo)致TCA可溶性計數(shù)的釋放小于1.0%。


雙鏈核酸內(nèi)切酶活性將含有0.5μgpBR322 DNA和10μL酶溶液的50μL反應(yīng)物在37℃下溫育4小時,結(jié)果通過瓊脂糖凝膠電泳確定沒有肉眼可察覺地轉(zhuǎn)化為帶切口的環(huán)狀DNA。

 

大腸桿菌  16S rDNA污染測試
復(fù)制酶溶液的5uL樣品變性,并在TaqMan qPCR測定中篩選污染性大腸桿菌基因組DNA,使用對應(yīng)于16S rRNA基因座的寡核苷酸引物。測試的驗收標(biāo)準(zhǔn)是由3個重復(fù)的無模板對照樣品的平均值產(chǎn)生的閾值循環(huán)計數(shù)(C t)?;跓o模板對照 Ct  值與標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)之間的相關(guān)性,該測定的檢測限為<10拷貝基因組/樣品。

 

 

 

部分產(chǎn)品信息:

貨號

品名

規(guī)格

濃度

品牌

N2070-10-L

 ATP Solution 

50 µmol

10 mM

Enzymatics

N2050-10-L

10 mM dNTP Solution Mix

100 µmol

10 mM

Enzymatics

N2010L

100 mM 75µmol dNTP Solution Set 

75 µmol

100 mM

Enzymatics

N2010-A-L

100 mM dATP Solution 

75 µmol

100 mM

Enzymatics

N2050L

100µmol dNTP Solution Mix 

100 µmol

25 mM

Enzymatics

Y9180L

10x Uracil Cleavage System 

750 Reactions

N/A

Enzymatics

P7670

2x HiFi PCR Master Mix 

1 rxn

2x

Enzymatics

Y9420L

5x ER/A-Tailing Enzyme Mix 

24 reactions

N/A

Enzymatics

Y9380L

E. coli Pyrophosphatase 

50 U

100 U/mL

Enzymatics

Y9030L

E. coli Single-Stranded DNA Binding Protein 

1.5 mg

2.75 mg/ml

Enzymatics

Y9140-HC-L

End-Repair Mix (High Concentration) 

75 Reactions

1 Rxn/µL

Enzymatics

Y9140-LC-L

End-Repair Mix (Low Concentration) 

200 Reactions

1 Rxn/µL

Enzymatics

Y9080L

Endonuclease VIII 

10,000 U

10,000 U/ml

Enzymatics

P7600L

EnzScript™ (MMLV Reverse Transcriptase RNase H-) 

10,000 U

200,000 U/mL

Enzymatics

X8010L

Exonuclease I 

30,000 U

20,000 U/ml

Enzymatics

X8020L

Exonuclease III 

50,000 U

100,000 U/ml

Enzymatics

P7010-HC-L

Klenow (3′→ 5′ exo-) (High Concentration) 

10,000 U

50,000 U/ml

Enzymatics

P7010-LC-L

Klenow (3′→ 5′ exo-) (Low Concentration) 

10,000 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7060L

Klenow Fragment 

2,500 U

5,000 U/ml

Enzymatics

X8030L

Lambda Exonuclease 

10,000 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7040L

M-MuLV Reverse Transcriptase 

100,000 U

200,000 U/ml

Enzymatics

P7090L

Mako DNA Polymerase (3′→ 5′ exo-) 

3,000 U

30,000 U/ml

Enzymatics

P7140-HC-L

Manta 1.0 DNA Polymerase (High Concentration) 

100,000 U

400,000 U/ml

Enzymatics

P7140-LC-L

Manta 1.0 DNA Polymerase (Low Concentration) 

100,000 U

40,000 U/ml

Enzymatics

P7610L

NGS Library Prep: 2X VeraSeq™ PCR Mix – 250 Reactions 

250 Reactions

2X

Enzymatics

P7590L

Phoenix™ Hot Start Taq DNA Polymerase 

500 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7460L

Poly(A) Polymerase 

1,000 U

5,000 U/mL

Enzymatics

Y9260L

RecA 

1.5 mg

2.0 mg/mL

Enzymatics

Y9220L

RNAse H 

5,000 U

5,000 U/ml

Enzymatics

Y9240L

RNAse Inhibitor 

20,000 U

40,000 U/ml

Enzymatics

L6010L

T3 DNA Ligase 

900,000 U

3,000,000 U/ml

Enzymatics

L6030-LC-L

T4 DNA Ligase 

150,000 U

120,000 U/ml

Enzymatics

L6030-HC-L

T4 DNA Ligase (Rapid) 

240,000 U

600,000 U/ml

Enzymatics

P7080L

T4 DNA Polymerase 

2,000 U

3,000 U/ml

Enzymatics

Y9130L

T4 Gene 32 Protein 

1.0 mg

10 mg/mL

Enzymatics

Y9040L

T4 Polynucleotide Kinase 

10,000 U

10,000 U/ml

Enzymatics

L6050L

T4 RNA Ligase 1 

10,000 U

20,000 U/ml

Enzymatics

L6080L

T4 RNA Ligase 2 

4,500 U

30,000 U/ml

Enzymatics

L6070L

T4 RNA Ligase 2 Truncated 

500 U

5,000 U/ml

Enzymatics

L6020L

T7 DNA Ligase 

900,000 U

3,000,000 U/ml

Enzymatics

P7260L

T7 DNA Polymerase 

3,500 U

10,000 U/ml

Enzymatics

P7180L

T7 RNA Polymerase 

50,000 U

50,000 U/ml

Enzymatics

L6060L

Taq DNA Ligase 

20,000 U

40,000 U/ml

Enzymatics

P7110L

Taq DSC 2.0 DNA Polymerase 

1,250 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7250L

Taq-B DNA Polymerase 

10,000 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7620L

TaqIT 

5,000 U

50,000 U/mL

Enzymatics

P7070L

Terminal deoxynucleotidyl Transferase (TdT) 

6,000 U

20,000 U/ml

Enzymatics

G5020L

Thermolabile UDG 

500 U

1,000 U/ml

Enzymatics

Y9370L

Thermostable Pyrophosphatase 

1,250 U

2,000 U/ml

Enzymatics

G5010L

Uracil DNA Glycosylase 

10,000 U

2,000 U/ml

Enzymatics

P7511L

VeraSeq™ 2.0 High-Fidelity DNA Polymerase 

500 U

2,000 U/ml

Enzymatics

P7520L

VeraSeq™ ULtra DNA Polymerase 

500 U

2,000 U/ml

Enzymatics

L6030-W-L

WGS Ligase 

24 Reactions

N/A

Enzymatics

P7640L

ZipScript™ One-Step RT-qPCR Kit 

1000 Reactions

N/A

Enzymatics

P7020-HC-L

φ29 DNA Polymerase (High Concentration) 

2,000 U

100,000 U/ml

Enzymatics

P7020-LC-L

φ29 DNA Polymerase (Low Concentration) 

2,000 U

10,000 U/ml

Enzymatics

 

世界*實驗材料供應(yīng)商 Enzymatics正式授權(quán)上海起發(fā)為其中國代理, Enzymatics在一直是行業(yè)的*,一直為廣大科研客戶提供zui為的產(chǎn)品和服務(wù),上海起發(fā)一直秉承為中國科研客戶帶來的產(chǎn)品,的服務(wù),簽約 Enzymatics就是為了給廣大科研客戶帶來更加完善的產(chǎn)品和服務(wù),您的滿意將是我們zui大的收獲

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Enzymatics公司建立于2006年,專門從事開發(fā)、制造和分銷酶產(chǎn)品,致力于酶產(chǎn)品研發(fā),為市場帶來了特殊的、高品質(zhì)的產(chǎn)品。 Enzymatics公司建立了嚴(yán)格完整的操作體系,通過了ISO13485:2003和9001:2000體系標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)證,并符合FDA 21 CFR.820質(zhì)量系統(tǒng)法規(guī)中對于常規(guī)用途試劑的生產(chǎn)規(guī)范。同時Enzymatics的生產(chǎn)能力被許多FDA認(rèn)證的醫(yī)療設(shè)備制造商以及的ISO認(rèn)證機(jī)構(gòu)TüV SüD 認(rèn)可。

 

 

我們公司zui大優(yōu)勢是強(qiáng)大的采購,

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上海起發(fā)實驗試劑有限公司
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