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Worthington LS004182 說明書

更新時(shí)間:2017-08-07      點(diǎn)擊次數(shù):2618

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Worthington Biochemical是一家始于1947年,位于美國新澤西州的生產(chǎn)高純度酶類及相關(guān)生化藥劑的世界*公司,公司致力于為客戶提供zui的產(chǎn)品及服務(wù)。Worthington供應(yīng)的生物藥劑主要純化于牛胰腺、植物、發(fā)酵產(chǎn)物及其他自然資源,公司專長的蛋白提取與純化技術(shù)保證了其所提供酶類擁有與其提取來源物中同等的生物活性,從而保證了研究結(jié)果的可靠性和穩(wěn)定性。目前Worthington提供的產(chǎn)品覆蓋細(xì)胞分離消化酶、DNA酶、RNA酶等幾乎所有生命科學(xué)研究領(lǐng)域。

公司主要產(chǎn)品:

一、無動(dòng)物成分來源的新產(chǎn)品

1、來源于溶組織梭狀芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物的膠原酶:該系列膠原酶*避免了動(dòng)物來源成分,適用于無動(dòng)物源成分膠原酶生物研究。主要產(chǎn)品包括:

CLSAFA:主要為膠原酶活性及其次的蛋白酶活性,性能與1/2型膠原酶類似。

CLSAFB:比CLSAFA有更高的膠原酶活性及酪蛋白酶活性

CLSAFC:有較低的胰蛋白酶活性,性能與4型膠原酶類似。

STZ1 & STZ2:為STEMxyme? AOF Collagenase/Neutral Protease (Dispase?) 混合物酶,適用于干細(xì)胞分離。

2、肌血球素:肌血球素是一個(gè)球形小分子,分子量約17KD,含有一個(gè)亞鐵血紅素分子,負(fù)責(zé)心肌和骨骼肌細(xì)胞哦氧氣存儲(chǔ)。

 

二、經(jīng)典細(xì)胞分離試劑

1、細(xì)胞分離優(yōu)化系統(tǒng)

Worthington Biochemical 公司提供一系列經(jīng)典的組織/細(xì)胞分離用酶的解決方案,包括多種酶類及相應(yīng)的使用說明、參考文獻(xiàn)與操作手冊,致力于使客戶利用酶促消化分離獲得zui大產(chǎn)量及活度的細(xì)胞。Worthington Biochemical 提供的產(chǎn)品種類繁多,適應(yīng)于不同類型組織細(xì)胞的分離,價(jià)格合理。主要產(chǎn)品包括膠原蛋白酶1/2/3/4,胰蛋白酶及其抑制劑,透明質(zhì)酸酶,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶以及DNA酶,中性蛋白酶等。

2、肝細(xì)胞分離系統(tǒng)

通常分離肝細(xì)胞的酶都是初制的或部分純化的酶類,里面除了膠原酶外還含有多種雜蛋白酶,不利于肝細(xì)胞的分離純化,實(shí)驗(yàn)可重復(fù)率低。Worthington 推出的精制1/4型膠原酶成分明確,特別適宜于肝細(xì)胞的分離純化,性能可靠,實(shí)驗(yàn)可重復(fù)率高,實(shí)驗(yàn)方案及參數(shù)固定,所分離的肝細(xì)胞純度與活性均較高。

3、新生鼠心肌細(xì)胞分離系統(tǒng)

Worthington供應(yīng)的新生鼠心肌細(xì)胞分離系統(tǒng)使用純化的分離酶,使心肌細(xì)胞分離批次間差異大為減小,而且細(xì)胞產(chǎn)量、純度及活性均得以提高。分離操作方便,方案可靠,實(shí)驗(yàn)可重復(fù)率高。

4、木瓜蛋白酶分離系統(tǒng)

Worthington供應(yīng)的木瓜蛋白酶適宜于消化分離形態(tài)完整、單個(gè)分散的細(xì)胞,適用于細(xì)胞培養(yǎng)、流式細(xì)胞術(shù)等多個(gè)研究領(lǐng)域。 該產(chǎn)品還可適用于溫和消化分離中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織(對胎鼠及新生鼠腦神經(jīng)元分離尤為適宜),獲得的細(xì)胞產(chǎn)量與活性優(yōu)于胰蛋白酶。

 

三、特色產(chǎn)品:

1、膠原酶

?Type 1含有膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶及胰蛋白酶活性。

?Type 2 含有更高水平的蛋白酶活性,特別是梭菌蛋白酶。

?Type 3 含有zui低水平的secondary proteases.

?Type 4在消化分離細(xì)胞時(shí)能zui大程度的保護(hù)細(xì)胞膜蛋白及上面的受體活性(胰蛋白酶消化時(shí)會(huì)損傷膜蛋白及其上受體)。

?Type 5 含有高度的膠原酶和酪蛋白酶活性。

?純化膠原酶(CLSPA/CLSPANK):含有高純度的膠原酶。

2、DNA

Worthington提供不同純化水平的NDA酶以適應(yīng)于不同的研究目的, 其中DPRFDPRFS含有zui低水平的RNA酶及蛋白酶活性,

適宜用于在消化清除DNA的同時(shí)zui大程度保護(hù)RNA及目的蛋白/酶類的研究,如RT-PCR實(shí)驗(yàn)中RNA制備時(shí)基因組DNA清除、轉(zhuǎn)錄后清除DNA模板、northern雜交時(shí)清除非目的DNADNA缺口平移、DNA 繪圖RNA/蛋白的分離,質(zhì)粒構(gòu)建,RNA合成等。Worthington不僅提供牛胰腺來源的DNA酶,而且還提供微生物來源的重組DNA酶,*無動(dòng)物來源成分,客戶可根據(jù)研究需要進(jìn)行選擇。

3、RNA

Worthington提供的RNA A/ B純化自牛胰腺組織,并有多種純化級別適宜于不同研究目的,如無DNA酶的RNA適宜于DNA的分離純化,無蛋白酶RNA酶適宜于需保存蛋白質(zhì)完整性與活性。

4、彈性蛋白酶

Worthington提供的彈性蛋白酶純化自豬胰腺,被廣泛應(yīng)用于組織/細(xì)胞的消化分離,特別適宜于II型肺細(xì)胞的分離。

5、木瓜蛋白酶:

Worthington提供的木瓜蛋白酶純化自番木瓜汁,相交于胰腺蛋白酶,木瓜蛋白酶能消化更多的蛋白亞基。在組織消化研究中,木瓜蛋白酶比其他蛋白酶有更高的效率及更低的損傷,適宜于神經(jīng)細(xì)胞的分離。

6、胰蛋白酶

Worthington提供的胰蛋白酶純化自牛胰腺組織,特別適宜于蛋白質(zhì)測序研究(TRTPCK)和組織/細(xì)胞消化分離研究。該系列產(chǎn)品純度高,保證了產(chǎn)品很好的溶解度、較小的批次差異及細(xì)胞毒性。 除了高純度胰蛋白酶外,Worthington還提供無病毒及支原體的胰蛋白酶以適應(yīng)不同的研究需要。

膠原酶產(chǎn)品信息

資料來源:溶組織梭菌

IUB:3.4.24.3

膠原酶原料認(rèn)證 

粗膠原酶制劑含有兩種不同膠原酶,巰基蛋白酶,clostripain,胰蛋白酶樣酶和氨基肽酶的多種同工型。這種膠原蛋白和蛋白水解活性的組合對于分解細(xì)胞間基質(zhì)是組織解離的重要部分是有效的。復(fù)合物的一個(gè)組分是水解酶,其在Pro-Y-Gly-Pro序列中Y-Gly鍵優(yōu)先降解天然膠原中的螺旋區(qū),其中Yzui常見為中性氨基酸。這種裂解產(chǎn)生易于進(jìn)一步消化肽酶的產(chǎn)物。粗膠原酶被金屬螯合劑如半胱氨酸,EDTA或鄰菲咯啉而不是DFP抑制。它也被大血漿糖蛋白α2巨球蛋白抑制。酶活性需要Ca 2+。每個(gè)膠原酶的特定酶譜與獲得研究細(xì)胞的組織(或用于細(xì)胞的用途)相關(guān)聯(lián),并且由于相關(guān)性,Worthington已經(jīng)建立了幾種類型的原膠原酶:類型1,2,3和4。

• 1型粗膠原酶具有膠原酶,酪蛋白酶,clostripain和胰蛋白酶活性的原始平衡。
• 2型含有較高的相對水平的蛋白酶活性,特別是clostripain。
• 3型含有zui低水平的次級蛋白酶。
• 4型設(shè)計(jì)為特別低的胰蛋白酶活性,以限制對膜蛋白和受體的損傷。
•純化膠原酶,代碼:CLSPA,含有極少的次要蛋白水解活性以及高膠原酶活性。

 

新! 動(dòng)物來源的自由類型AFA,AFB和AFC,STZ1和STZ2膠原酶源自在*缺乏動(dòng)物基組分的培養(yǎng)基中生長的培養(yǎng)物,并且被設(shè)計(jì)用于必須預(yù)防引入潛在的動(dòng)物來源的病原體的生物處理應(yīng)用。次級蛋白酶水平與1型和2型膠原酶相似。

•  CLSAFA 是原始的AF*別,設(shè)計(jì)為膠原酶和次級蛋白酶類似于1型和2型膠原酶。
•  CLSAFB 含有比CLSAFA更高的膠原酶和酪蛋白酶活性。
•  CLSAFC具有類似于4型膠原酶的特異性 低胰蛋白酶活性。
•  STZ1和STZ2,0.22μ過濾的STEMxyme AOF膠原酶/中性蛋白酶(Dispase®)混合物用于原代和干細(xì)胞分離。 

 

沃辛頓還提供0.22μm過濾的各種預(yù)制包裝形式的過濾制劑,用于直接重建和用于細(xì)胞分離和培養(yǎng)過程。酶類型與不同組織的有效性之間的相關(guān)性一直很好,但不*,部分原因是可變參數(shù)的使用。然而,大多數(shù)研究人員認(rèn)為粗膠原酶批次的組織分型是一項(xiàng)有價(jià)值的服務(wù)。Worthington酶手冊中可以找到Worthington膠原酶和污染物測定的詳細(xì)描述。此外,組織特異性參考和詳細(xì)的分離條件可以在“ Worthington組織分離指南”中找到。

膠原酶測定是Mandl的修飾,其中膠原酶與天然膠原蛋白孵育5小時(shí),膠原分解的程度使用Moore和Stein JBC,176,367(1948)比色茚胺法測定。釋放的氨基酸表達(dá)為微摩爾亮氨酸/毫克膠原酶。

用途:粗膠原酶廣泛用于酶原初級細(xì)胞分離和組織解離過程。大多數(shù)研究人員使用粗膠原酶制劑,如1,2,3和4型或色譜純化的膠原酶(代碼:CLSPA); 后者通常與二級酶如彈性蛋白酶,透明質(zhì)酸酶等組合。為了獲得*效果,必須將待分解的組織定制為蛋白水解活性的混合物。不同組織的類型和有效性之間的相關(guān)性已經(jīng)很好,但不,并且可能部分依賴于使用和目標(biāo)參數(shù)以及批次間變化。有關(guān)更多信息,請參閱膠原酶采樣程序信息。沃辛頓還出版了“ 組織解離指南”,其中提供了有關(guān)用于這些應(yīng)用的酶的更多信息,以及許多細(xì)胞和組織類型的具體參考。

單位定義:一個(gè)單位在37℃,pH 7.5的5小時(shí)內(nèi)從膠原中釋放一微摩爾的L-亮氨酸當(dāng)量

 

相關(guān)產(chǎn)品信息如下:

膠原酶,3型
較低的次級蛋白水解污染物活性,但具有典型的膠原酶活性。建議用于乳腺原代細(xì)胞分離。透析凍干粉。 
存儲(chǔ)在2-8癈。
≥100單位/ mg干重CLS-3100毫克LS004180
1克LS004182
5克LS004183
LS004185

 

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